Antecedentes. En la actualidad, no se dispone de integrina β3 de manera comercial y la PDI comercial tiene costos muy altos, lo cual dificulta el acceso a estas dos proteínas para realizar estudios conducentes a establecer si β3 y PDI interactúan con cepas de rotavirus silvestres. Objetivo. Explorar una metodología que permitiese aislar las proteínas β3 y PDI a partir de plaquetas humanas para generar anticuerpos policlonales en conejo contra la integrina β3 y evaluar la interacción entre las proteínas PDI y β3 con el rotavirus ECwt. Material y métodos. Mediante la técnica de electroforesis preparativa en condiciones reductoras, se separaron las proteínas de un lisado de plaquetas humanas y posteriormente se electroeluyeron. Mediante las técnicas de coinmunoprecipitación, "Western blotting" y ELISA de captura se analizó la interacción del rotavirus ECwt con las proteínas β3, y PDI. Resultados. Las proteínas totales de un lisado de plaquetas humanas se separaron mediante electroforesis en condiciones reductoras, se identificaron las proteínas β3 y PDI en un segmento del gel, utilizando anticuerpos comerciales en "Western blotting" y luego se aislaron estas dos proteínas del resto del gel. Posteriormente las proteínas se electroeluyeron del segmento del gel y se analizó su pureza. La proteína β3 se utilizó para generar anticuerpos policlonales en conejo. Igualmente, β3 y PDI eluidas se incubaron con el rotavirus ECwt y mediante la técnica de co-inmunoprecipitación y ELISA de captura encontramos que estas dos proteínas se unen in vitro. Esta misma unión se observó cuando se incubó las vellosidades aisladas de intestino delgado de ratón lactante con el rotavirus. Conclusión. Se logró purificar parcialmente a partir de plaquetas humanas, utilizando electroforesis preparativa, cantidades relativamente altas de proteína β3 y PDI. El aislamiento de estas proteínas nos permitió generar un anticuerpo policlonal contra β3 y establecer que β3 y PDI se unen in vitro, luego de incubar las proteínas aisladas con el rotavirus ECwt, e in vivo, después de incubar el rotavirus con las vellosidades aisladas del intestino delgado de ratón lactante de la cepa ICR.

Background. Commercial integrin β3 is currently not available and commercial PDI is too expensive, which is making access difficult to these proteins needed for conducting experiments aimed at the establishment of possible interactions between integrin β3 and PDI and wild type rotavirus strains. Objective. To explore a methodology allowing isolation of proteins β3 and PDI from human platelets to be used as antigens in the generation of rabbit polyclonal antibodies useful in the assessment of interactions between these proteins and rotavirus ECwt. Materials and methods. Proteins β3 and PDI from human platelet lysates were separated using preparative electrophoresis under reducing conditions and then eluted. Interactions of these proteins with rotavirus ECwt were analyzed using co-immunoprecipitation, Western blotting and capture ELISA. Results. Proteins from human platelet lysates were separated by preparative electrophoresis under reducing conditions. The identification of proteins β3 and PDI present in a gel slice was performed through their reaction with commercial antibodies in a Western blotting analysis. Protein purity was established after electroelution from a gel slice. Polyclonal antibodies against protein β3 were generated in rabbit. Incubation of eluted proteins β3 and PDI with rotavirus ECwt showed in co-immunoprecipitation and ELISA assays that these proteins bound virus in vitro. The same binding was showed to occur when rotavirus was incubated with isolated small intestinal villi from suckling mice. Conclusions. Relatively high amounts of proteins β3 and PDI were partially purified from human platelets by preparative electrophoresis. The isolation of these proteins allowed the generation of polyclonal antibodies against β3 in addition to the establishment of the in vitro interaction of proteins β3 and PDI with rotavirus ECwt. This interaction was also demonstrated in vivo after incubating the virus with isolated small intestinal villi from suckling mice.

Este trabalho destinou-se a verificar a freqüência dos fatores etiológicos que podem atuar em casos de distúrbios de conduta quando os sintomas básicos são irritabilidade, agressividade, impulsividade e instabilidade psico-motora. Foram revistas 100 observações de pacientes menores, de ambos os sexos, com idade variando entre 5 a 16 anos, atendidos no Ambulatório do Serviço de Psiquiatria Infantil do Hospital de Psiquiatria da Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo. Em 15 pacientes não foi possível evidenciar circunstâncias ou fatores orgânicos que pudessem estar diretamente relacionados à etiologia dos citados distúrbios. Nos demais, foram encontrados fatores etiológicos provavelmente relacionados com o quadro clínico, na seguinte freqüência: disritmia cerebral, em 69 casos; condições ambientais desfavoráveis, em 37 casos; oligofrenia, em 35 casos; sofrimento cerebral, em 3 casos. A importância dos fatores ambientais e da oligofrenia na gênese dos distúrbios de conduta já é plenamente conhecida e por isso não surpreende a freqüência com que foram encontrados. Inesperada, no entanto, foi a alta incidência de disritmia cerebral nesta casuística: 68% contra mais ou menos 10% encontrados na população em geral, segundo os estudos de eletrencefalografia e epilepsia. Diferença tão grande dispensa análise estatística e indica um fator de extrema importância na origem dos distúrbios de conduta que, entretanto, não costuma ser valorizado e nem mesmo citado nos estudos sobre esse tema. As conclusões deste trabalho sugerem uma revisão na terapêutica dos distúrbios de conduta. Ao lado dos métodos pedagógicos e psicoterápicos, únicos habitualmente recomendados, deve ser incluído o tratamento antiepilético, uma vez que, em nossa experiência esta pode dar ótimos resultados sobre a irritabilidade, a agressividade, a impulsividade e a instabilidade manifestadas em pacientes com disritmia cerebral.

This work was developed in order to verify the rate of occurance of the etiological factors which may actuate in cases of behaviour disturbs, when the basic symptoms are irritability, agressiveness, impulsiveness and psycho-motor instability; 100 observations were reviewed, of patients of both sexes, whose ages varied withing the range of 5 to 16 years old and who were assisted at the Child Psychiatry Service, University of São Paulo School of Medicine. In 15 of these patients it was not possible to make clear the organic circumstances or psychological factors which might be directly related to the etiology of such above mentioned disturbs. As to the remaining patients, etiological factors were found which are probably related to the clinical chart in the following rate of occurance: cerebral disrythmia, in 69 cases; unfavourable environment conditions, in 37 cases; oligophrenia, in 35 cases; cerebral damage, in 3 cases. The importance of the environment factors and oligophrenia in the genesis of behaviour disturbs is already well known and, therefore, their rate of occurance does not cause any surprise. It was unexpected, however, the high incidence of cerebral disrythmia in this work: 68% against approximately 10% found among the population in general, according to the monographs about epilepsy and electroencepholography. So great a difference exempts any statistic analysis and indicates an extremely important factor in the origin of behaviour disturbs which, however, is not usually valuated and not even mentioned in the studies about that subject. The final conclusions of this work suggest a reviewal in the therapeutics of behaviour disturbs. Together with the pedagogic and psychotherapic methods, the sole ones usually recommended, also the anti-epileptic treatment must be included, once in our experiments this treatment can provide good results over irritability, agressiveness, impulsiveness and instability shown by patients with cerebral disrythmia.

Foram estudados os efeitos do tiotixene (P-4657B) em 34 crianças e adolescentes psicóticos dos quais '29 eram esquizofrênicos, tendo 17 deles menos de um ano de tempo de doença e 12 mais de um ano de doença. Foram obtidos bons resultados em 20 casos com nítida melhora na sintomatologia psíquica. Os efeitos colaterais foram de pequena intensidade. Os exames subsidiários (hemograma, provas de função hepática e eletrencefalograma) não revelaram alterações significativas. Assim o tietixene confirmou sua atividade antipsicótica não só nos casos em que foi o primeiro tratamento instituído como também em alguns pacientes que tinham sido tratados com outras drogas antipsicóticas sem resultados satisfatórios. Foi assinalado efeito nítido sobre o apragmatismo e o embotamento afetivo. Ocorreu ação sedativa nas agitações psicomotoras devendo-se salientar que o resultado positivo se fez quase sempre sentir com dose mínima (5 — 10 mg/dia) já nos primeiros dias de tratamento. Foi ótima a tolerância ao medicamento. Os efeitos colaterais foram mínimos. Sendo a esquizofrenia em crianças e adolescentes de difícil tratamento, a existência desta nova droga é, na opinião dos autores, uma util contribuição para sua terapêutica.

The effects of thiothixene (P-4657 B) in 34 psychotic children and adolescents were studied; 29 were schizophrenic subjects, 17 had been ill for less than one year and 12 for a longer time. Good results were observed in 20 cases, with evident improvement of the psychiatric symptomatology. Tolerance has been very good and side effects minimum. Subsidiary examinations (hemoglobin level and leucocyte count, tests for evaluation of the functional state of the liver and electroencephalogram) were normal. The thiothixene was observed to have an antipsychotic effect when used as the first treatment, as well as when the patient had already been treated with other antipsychotic drugs without satisfactory result. Remarkable effects were noticed on apragmatism and emotional blunting. Sedative effect was observed on crises of psychomotor instability. Positive result, were almost always noticed with minimum dosage (5 — 10 mg per day) in the early stage of treatment.